تبلیغات
بنر ساده 60 در 468 اطلاعات درباره ی همه چیز - تشخیص آزمایشگاهی میکوباکتریوم ها با استفاده از رنگ آمیزی اسید فاست
 
اطلاعات درباره ی همه چیز
لطفا ما را در تلگرام همزاهی کنید tarfandodanestani@
                                                        
درباره وبلاگ

‌‌ میخوای با ترفند و دانستنی های دنیا آشنا بشی ؟؟

دنبال مطالب خنده دار و جوک هستی ولی پیدا‌‌ نمی کنی ؟

بیا تو کانال ما

لینک کانال :

tarfandodanestani@

مدیر وبلاگ : امیرعلی فتح اللهی
کسب درآمد 500 هزار تومان در ماه
نظرسنجی
لطفا میزان رضایت مندی خود از مطالب این وبلاگ را بیان نمایید





آمار وبلاگ
  • کل بازدید :
  • بازدید امروز :
  • بازدید دیروز :
  • بازدید این ماه :
  • بازدید ماه قبل :
  • تعداد نویسندگان :
  • تعداد کل پست ها :
  • آخرین بازدید :
  • آخرین بروز رسانی :
کسب درآمد 500 هزار تومان در ماه

تشخیص آزمایشگاهی میکوباکتریوم ها با استفاده از رنگ آمیزی اسید فاست:
 
رنگ آمیزی اسید فاست یکی از مهم ترین روش های تشخیصی میکروباکتریوم ها به ویژه میکروباکتریوم توبرکلوزیس و میکروباکتریوم لپره محسوب می شود. علاوه بر این با استفاده از رنگ آمیزی اسید فاست می توان اکتینومیست های جنس نوکاردیا از جمله نوکاردیا استروئیدس و نوکاردیا برازیلنسیس را که به عنوان عوامل نوکاردیوزیس ریوی مطرح هستند شناسایی نمود. همچنین تک یاخته انگلی کریپتوسپوریدیوم که عامل عفونت گوارشی و اسهال در انسان می باشد با این روش قابل شناسایی است.
[vip-members]مقدمه
میکروباکتریوم ها باسیل های بدون حرکت و بدون اسپور می باشند که در دیواره سلولی خود علاوه بر پپتیدوگلیکان، مقادیر زیادی گلیکولیپید به ویژه اسید میکولیک دارند، به طوری که حدود 60 درصد دیواره سلولی باکتری را اسید میکولیک تشکیل می دهد.
دیواره سلولی این باکتری ها شبیه موم (wax) بوده و نسبتا غیر قابل نفوذ است. اسید میکولیک و سایر گلیکولیپیدها نفوذ مواد شیمیایی مورد نیاز برای رشد باکتری ها را آهسته می کند، همچنین باکتری را در مقابل عوامل شیمیایی باکتری کش و ترکیبات لیزوزومی محافظت می نماید. حتی این باکتری ها را در مقابل خشکی مقاوم می سازد. با این وجود باسیل سل توسط پاستوریزاسیون و سترون سازی عادی توسط حرارت به آسانی از بین می رود.
میکروباکتریوم ها به شدت هوازی هستند و رشد بسیار آهسته ای دارند. (زمان دو برابر شدن باکتری 18 ساعت است). میکوباکتریوم های پاتوژن انسانی به 2 تا 6 هفته انکوباسیون در محیط های کشت پیچیده نیاز دارند. میکوباکتریوم لپره عامل بیماری جذام را نمی توان در محیط های کشت میکروبی پرورش داد. سرعت کم رشد این باکتری ها سبب شده که سرعت تشخیص آن نسبت به سایر باکتری ها بسیار کمتر باشد، به همین دلیل روش های سریع تشخیصی از جمله تست های سرولوژیکی و ایمونولوژیکی و تست های سریع مولکولی ابداع شده اند.
توجهات ایمنی کار با میکروباکتریوم ها
ماهیت خطرناک بیماری سل و انتقال سریع آن از راه

هوا سبب شده که مراقبت های ویژه ای جهت کار با میکوباکتریوم ها مد نظر قرار گیرد. در همین راستا آزمایشگاه های تخصصی با امکانات ویژه جهت جداسازی و تشخیص این باکتری ها مورد استفاده قرار می گیرند. مهمترین نکات ایمنی که هنگام کار با نمونه های مشکوک به سل باید رعایت شوند، عبارتند از:
1 – حفاظت شخصی
2 – تهویه مناسب
3 – استفاده از کابینت های حفاظتی
4 – استفاده از ضدعفونی کننده های مناسب از جمله هیپوکلریت سدیم، فرم آلدئید و فنل
جمع آوری و آماده سازی نمونه
جداسازی موفقیت آمیز میکوباکتریوم ها به جمع آوری و انتقال صحیح نمونه بستگی دارد. در بیماری سل جمع آوری نمونه های بالینی از نقاط مختلف بدن صورت می پذیرد که عبارتند از: نمونه ترشحات تنفسی مانند خط یا آسپیره ریه، ادرار، مدفوع، خون و مایع مغزی- نخاعی.
برای تشخیص بیماری سل، حداقل 3 نمونه خلط صبحگاهی از بیمار گرفته می شود. نمونه ها باید در حجم 5 تا 10 میلی لیتر با سرفه های عمیق صبحگاهی جمع آوری شوند. نمونه های نقاط غیر استریل بدن از جمله دستگاه تنفس، قبل از کشت آماده سازی می شود، ولی نمونه هایی که از مناطق استریل بدن مثل خون جمع آوری می شوند، نیازی به آماده سازی نداشته و تنها باید تغلیظ گردند.
آماده سازی نمونه
آماده سازی نمونه شامل مراحل هموژنیزاسیون، حذف آلودگی و تغلیظ نمونه می باشد. برای این منظور می توان از موادی نظیر هیدروکسید سدیم (NaOH) و N-استیل L-سیستئین استفاده نمود.
NaOH با غلظت 2 تا 4 درصد می تواند هم به عنوان هضم کننده و هم کشنده سایر میکروب ها عمل کند. اما استفاده از آن بایستی با دقت صورت گیرد، زیرا در زمان بیش از 15 دقیقه میکوباکتریوم ها نیز در خطر نابودی قرار می گیرند. بنابراین با کمک معرف فنل رد و اسید کلریدریک در کمتر از 15 دقیقه مراحل خنثی سازی انجام می شود.
استفاده توام از N-استیل L-سیستئین به همراه NaOH به عنوان هضم کننده موکوس می تواند باعث شود که غلظت کمتری از هیدروکسید سدیم مورد استفاده قرار می گیرد.
در نمونه های مشکوک به آلودگی با پسودوموناس مثل خلط بیماران مبتلا به سیستیک فیبروزیس، از اسید اگزالیک 5 درصد برای آماده سازی استفاده می شود.
برای تغلیظ نمونه از سانتریفوژ با سرعت g3000 به مدت 15 دقیقه بهره می گیرند. با این عمل میکوباکتریوم ها در انتهای لوله جمع شده و پس از خالی نمودن محلول رویی، از رسوب حاصل جهت رنگ آمیزی و کشت استفاده می شود.
تست توبرکولین
در روند اولیه، میزبان نسبت به باسیل های سل دچار ازدیاد حساسیت شده و این امر از طریق مثبت شدن تست جلدی یا واکنش توبرکولین مشخص می شود. تست مثبت توبرکولین نشان می دهد که شخص در گذشته به باسیل سل آلوده شده و همچنان میکروباکتریوم های زنده را در برخی از بافت های خود حمل می کند، ولی نمی توان به بیماری فعال یا ایمنی نسبت به بیماری پی برد. افرادی که تست جلدی مثبت دارند در معرض خطر پیشرفت بیماری از طریق فعال شدن مجدد عفونت اولیه می باشند، در حالی که افراد توبرکولین منفی کسانی هستند که قبلا هرگز به باسیل سل آلوده نشده اند و در معرض بیماری نیستند. برای انجام این تست پروتئین های خالص مشتق شده (PPD) را به میزان 5 واحد توبرکول به صورت زیر جلدی به فرد مشکوک تزریق می کنند، در صورتیکه پس از 48 تا 72 ساعت سفتی بیش از 10 میلیمتر مشاهده گردد دلیل بر مثبت بودن تست می باشد. البته افرادی که واکسن BCG دریافت کرده اند، نتیجه مثبت کاذب نشان می دهد.
کشت و ایزولاسیون میکوباکتریوم ها
میکوباکتریوم ها به شدت هوازی بوده و رشد بسیاری آهسته ای دارند. زمان دو برابر شدن باکتری (G.T) به طور متوسط 12 ساعت و در مورد باسیل سل 20 تا 22 ساعت می باشد. سریع رشد ترین میکوباکتریوم ها در مدت 2 تا 3 روز رشد کرده و میکوباکتریوم های بیماری زا در طی 2 تا 6 هفته رشد می نمایند. در محیط حاوی 5 تا 10 درصد دی اکسید کربن رشد بهتری دارند.
محیط های مناسب کشت برای میکوباکتریوم ها
Egg Based Media – این محیط حاوی تخم مرغ، پودر سیب زمینی، گلیسرول، املاح و رنگ مالاشیت گرین است. مالاشیت گرین از رشد باکتری های گرم مثبت جلوگیری می کند. مثال Lowenstein Jensen
Serum or Agar Based Media – محیط های سرم آلبومین مانند محیط میدلبروگ آگار (Middlebrook) شامل نمک های مختلف، ویتامین ها، کوفاکتورها و مالاشیت گرین می باشد که با اسید اولئیک و آلبومین گاوی غنی شده است. این محیط شفاف بوده و می توان با بزرگنمایی کم میکروسکوپ کلنی های اولیه را در محیط کشت شناسایی کرد.
Liquid Media – در محیط های مایع، گونه های میکوباکتریوم می توانند سریع تر رشد کنند. محیط میدلبروگ براث جهت کشت مجدد (Subculture) سویه های ذخیره (Stock) استفاده می شود.
تست های تشخیصی میکوباکتریوم ها
برای تشخیص میکوباکتریوم ها ابتدا رنگ آمیزی اسید فاست انجام شده سپس نمونه را بر روی محیط های جامد کشت می دهند و خصوصیات فنوتیپی از قبیل مورفولوژی کلنی، سرعت رشد، دمای بهینه رشد، واکنش های بیوشیمیایی و پیگمانتاسیون نسبت به نور مورد بررسی قرار می گیرد.
خصوصیات کلنی میکوباکتریوم ها به دلیل وجود فاکتور طنابی (Cord factor) که باعث ایجاد رشته های خمیده باسیل می شود، کلنی خشک و خشن به رنگ سفید شیری تا کرم رنگ ایجاد می کنند.
سرعت رشد بسته به گونه میکوباکتریوم از 3 تا 60 روز متغیر است.
واکنش در برابر نور میکوباکتریوم ها نسبت به نور 3 نوع واکنش نشان می دهند که عبارتند از :
الف – فتوکرموژن (Photochromogen) – گونه هایی که در مجاورت نور رنگدانه های کاروتن ایجاد می کنند.
ب – اسکوتوکروموژن (Scotochromogen) – گونه هایی که هم در تاریکی و هم در روشنایی ایجاد رنگدانه می کنند.
ج – غیر کروموژن (Nonchromogen) – گونه هایی مانند میکوباکتریوم توبرکلوزیس که در هیچ شرایطی قادر به تولید رنگدانه نیستند.
تست های بیوشیمیایی
این تست ها به دلیل سرعت آهسته رشد ممکن است چندین هفته به طول انجامد. مثل تست تجمع نیاسین، تست احیا نیترات، تست پیرازین آمیداز، تست احیا تلوریت و





نوع مطلب :
برچسب ها : تشخیص آزمایشگاهی میکوباکتریوم ها با استفاده از رنگ آمیزی اسید فاست، گزارش کار علوم آزمایشگاهی، درامد میلیاردی، پرپول، طلایابی، دفینه یابی، شاقول گنج یابی،
لینک های مرتبط :




دوشنبه 12 آذر 1397 11:10 ب.ظ

Point certainly used.!
prezzo di cialis in bulgaria cialis generic availability cialis sale online click here cialis daily uk cialis flussig look here cialis order on line cialis 50 mg soft tab canadian drugs generic cialis cialis 5mg cialis 5 mg funziona
دوشنبه 12 آذر 1397 10:18 ق.ظ

Effectively spoken of course! !
we choice free trial of cialis rezeptfrei cialis apotheke non 5 mg cialis generici cialis free trial cialis farmacias guadalajara tadalafil 20mg cialis dose 30mg usa cialis online buy cialis online cialis dosage
یکشنبه 11 آذر 1397 10:37 ب.ظ

Superb material. Thanks.
200 cialis coupon import cialis buy cialis uk no prescription get cheap cialis cialis baratos compran uk cialis side effects dangers cialis from canada we use it cialis online store cialis rckenschmerzen cialis professional from usa
شنبه 10 آذر 1397 09:32 ق.ظ

You said it perfectly..
cialis e hiv how do cialis pills work generic cialis pill online generic for cialis estudios de cialis genricos cialis generico en mexico cialis 20 mg cialis generico milano how do cialis pills work cialis coupon
جمعه 9 آذر 1397 10:15 ب.ظ

Great content. Kudos.
link for you cialis price safe site to buy cialis online cialis kaufen bankberweisung safe site to buy cialis online acheter cialis kamagra 5 mg cialis coupon printable cialis generic tadalafil buy cialis prezzo al pubblico usa cialis online cialis patentablauf in deutschland
پنجشنبه 8 آذر 1397 11:57 ق.ظ

Thank you, Terrific stuff.
cialis authentique suisse order cialis from india what is cialis tadalafil tablets cialis price in bangalore generic for cialis cialis cost trusted tabled cialis softabs sialis cialis professional from usa
چهارشنبه 7 آذر 1397 11:18 ب.ظ

Great postings. Thanks.
cialis generico in farmacia cialis flussig cialis pills in singapore cialis generique non 5 mg cialis generici safe site to buy cialis online generic cialis in vietnam side effects for cialis enter site natural cialis female cialis no prescription
چهارشنبه 7 آذر 1397 11:16 ق.ظ

Excellent data. Thanks a lot.
cialis in sconto buy online cialis 5mg comprar cialis 10 espa241a tadalafil 10 mg cialis generico postepay look here cialis order on line cialis lilly tadalafi cialis 30 day sample cialis italia gratis cialis 5mg billiger
دوشنبه 9 مهر 1397 06:26 ب.ظ

Thanks a lot, A lot of advice!

we recommend cialis best buy brand cialis generic cialis rezeptfrei cialis super kamagra cialis flussig the best choice cialis woman how to purchase cialis on line cialis para que sirve side effects for cialis cialis 5 effetti collaterali
یکشنبه 1 مهر 1397 03:57 ب.ظ

You actually reported that perfectly!
good canadian online pharmacies canadian pharcharmy online24 pharmacy canada online prescriptions canada medications information cialis canadian pharmacy canadian medications, liraglutide buy viagra 25mg best canadian pharmacy canada online pharmacies for men northwestpharmacy
چهارشنبه 28 شهریور 1397 11:51 ق.ظ

Nicely put, Regards!
cialis farmacias guadalajara we like it safe cheap cialis trusted tabled cialis softabs calis cialis herbs what is cialis import cialis buy generic cialis enter site 20 mg cialis cost enter site very cheap cialis
سه شنبه 23 مرداد 1397 09:59 ق.ظ

Many thanks! An abundance of write ups!

where to buy viagra uk buy viagra online paypal buy sildenafil online cheap viagra alternative where to buy viagra online buy viagra online without prescription where can i buy viagra without a prescription buy viagra viagra no rx buy viagra online overnight
سه شنبه 23 مرداد 1397 01:27 ق.ظ

Nicely put. Thanks a lot!
price cialis best generic cialis soft gels cuanto cuesta cialis yaho cialis uk next day we choice free trial of cialis cialis therapie cialis daily look here cialis cheap canada dose size of cialis miglior cialis generico
دوشنبه 7 خرداد 1397 04:51 ب.ظ

Amazing information. Cheers!
buy cheap cialis in uk cilas cialis 20 mg best price we recommend cialis best buy buy cialis cialis 05 cialis daily dose generic how much does a cialis cost cialis kaufen bankberweisung tesco price cialis
سه شنبه 4 اردیبهشت 1397 02:52 ق.ظ

Amazing a good deal of wonderful material!
can you buy viagra at walmart buy viagra safely online buy cheap viagra canada online sildenafil uk how can i buy viagra without seeing a doctor viagra cheap online uk cheapest place to buy viagra viagra with prescription online find viagra online usa viagra online
جمعه 3 فروردین 1397 02:38 ب.ظ

Beneficial postings. Regards!
acheter du cialis a geneve click here take cialis cialis wir preise generico cialis mexico acheter cialis kamagra dosagem ideal cialis cialis 10mg prix pharmaci we choice cialis pfizer india viagra cialis levitra cialis coupons printable
جمعه 1 اردیبهشت 1396 01:06 ق.ظ
Hello there I am so thrilled I found your blog, I really found you by error, while I was researching on Askjeeve for something else, Anyhow I am here now and would just like
to say thanks a lot for a marvelous post and a all round entertaining blog (I also love the theme/design), I don't have time to read it all at the moment
but I have saved it and also included your RSS feeds, so when I have
time I will be back to read much more, Please do keep up the superb job.
 
لبخندناراحتچشمک
نیشخندبغلسوال
قلبخجالتزبان
ماچتعجبعصبانی
عینکشیطانگریه
خندهقهقههخداحافظ
سبزقهرهورا
دستگلتفکر